檢驗科

1. 慢性乙肝是一種怎樣的疾病 肝臟是人體中最大的實質(zhì)性腺體，同時也具有包括分泌膽汁、代謝、造血、合成蛋白質(zhì)、凝血因子及吞噬、免疫等諸多功能。乙型肝炎是常見的傳染疾病之一，嚴(yán)重威脅人類的身心健康，是一種與免疫相關(guān)的疾病。乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是DNA嗜肝病毒, 人體感染HBV后, 病毒介導(dǎo)的免疫損傷會造成肝臟的損傷。在乙肝的發(fā)病機制中宿主的免疫應(yīng)答起主要作用。部分患者因其免疫功能缺陷逐漸發(fā)展為慢性感染, 成年人感染乙型肝炎病毒后約有10%發(fā)展為慢性乙型肝炎，而嬰幼兒時期感染乙型肝炎病毒會有30%發(fā)展為慢性感染。由于HBV-DNA的持續(xù)復(fù)制，可進一步使患者機體免疫系統(tǒng)功能紊亂, 肝功能失代償后反過來影響機體免疫系統(tǒng)，造成機體免疫系統(tǒng)失衡，加重肝臟炎癥反應(yīng)及肝細胞的纖維化, 嚴(yán)重者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌等。乙肝后肝硬化患者由于肝功能受損、病毒的長期慢性感染及門脈高壓癥的形成直接導(dǎo)致內(nèi)環(huán)境的紊亂進而甚至危及患者生命 2. 慢性乙肝的進展和轉(zhuǎn)歸跟機體的細胞免疫功能密切相關(guān) 乙型病毒性肝炎的發(fā)病機制并不是由HBV直接引起，目前認為，免疫功能低下及免疫調(diào)控系統(tǒng)的紊亂及其導(dǎo)致的慢性肝損害過程是引起不同臨床表現(xiàn)的重要原因之一。因此乙型病毒性肝炎其實是一種免疫相關(guān)疾病。宿主的免疫反應(yīng)與病毒共同作用造成乙肝細胞損傷和炎癥反應(yīng)。乙肝感染患者轉(zhuǎn)歸和多種表現(xiàn)形式主要取決于機體本身的抗病毒免疫的活躍程度及強度。HBV抗原引起的免疫應(yīng)答與病情發(fā)展、抗病毒治療停止后病毒的反跳均有密切關(guān)聯(lián)。細胞免疫及體液免疫均在肝細胞損害的發(fā)生中起著重要作用，其中在肝臟的損害過程中起到主導(dǎo)作用的是細胞免疫應(yīng)答。 T 、B淋巴細胞為重要的細胞免疫組成部分，反映慢性乙肝患者的免疫狀態(tài)。T淋巴細胞在機體感染HBV后所產(chǎn)生的免疫應(yīng)答中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。機體感染HBV后, 由于HBV-DNA大量復(fù)制,會損耗大量CD4+ T淋巴細胞，從而影響患者T細胞亞群的表達水平,導(dǎo)致免疫功能紊亂。體內(nèi)淋巴細胞亞群的平衡被打破，慢性乙型肝炎患者外周血 CD4+ T 細胞數(shù)量減少，而抗原慢性刺激致CD8+ T淋巴細胞表達增加，CD4+ / CD8+ 比值降低，導(dǎo)致不能完全清除 HBV，反復(fù)的肝臟炎癥發(fā)作。而高載量的 HBV 同時抑制細胞免疫功能，在慢性乙型肝炎患者體內(nèi)形成一種惡性循環(huán)。研究發(fā)現(xiàn)隨著HBV病毒載量的不斷增加，機體免疫調(diào)控作用逐漸增強，表現(xiàn)為高病毒載量組比低病毒載量組患者CD4+ T細胞減少、CD8+ T細胞增多、CD4+ / CD8+ 降低。 細胞免疫功能低下是慢性乙肝患者病情進展的一個重要因素，在清除細胞內(nèi)乙肝感染病毒中細胞毒性T細胞發(fā)揮著重要的作用。CD4+和CD8+兩群T細胞維持機體主要的細胞免疫功能，正常情況下兩者應(yīng)保持一定比例。而研究表明慢乙肝患者均存在體內(nèi)細胞免疫功能紊亂，乙肝的慢性化是由于 B、T 淋巴細胞亞群失衡，特別是CD3+ CD4+ T淋巴細胞降低使機體無法有效的清除入侵的HBV病毒，導(dǎo)致病情進展。CD4+ /CD8+ 比值降低使免疫系統(tǒng)紊亂，并出現(xiàn)免疫病理改變。慢乙肝患者的病毒復(fù)制水平、肝損害程度、免疫反應(yīng)形式等個體差異很大，但細胞免疫被一致認為是 HBV 感染后引起肝細胞損傷的主要原因，也是機體清除細胞內(nèi)病毒的主要機制。 2. 流式細胞術(shù)FCM檢測患者T淋巴亞群的數(shù)量和比例，是評估慢乙肝患者細胞免疫功能的重要手段 應(yīng)用FCM檢測HBV感染患者的T淋巴細胞亞群的數(shù)量和比例，在臨床上對于急慢性肝炎的診斷，病情進展、治療和監(jiān)測具有重要意義。分析HBV感染后不同臨床轉(zhuǎn)歸者的細胞免疫功能的變化，初步結(jié)果顯示：1）與正常對照組相比，慢乙肝患者和HBV攜帶者CD4+T細胞，CD8+T細胞細胞計數(shù)均減少，提示機體參加免疫反應(yīng)的免疫活性細胞不足，導(dǎo)致機體清除病毒的能力降低；2）與正常對照組和HBV攜帶者相比，慢性乙肝患者CD8+CD38+T細胞比例升高，經(jīng)抗病毒治療后，隨著HBV DNA的下降，激活亞群的比例也顯著減少，提示患者體內(nèi)存在T淋巴細胞的異常激活，這可能正是其肝細胞損傷的原因之一；3）慢性乙肝患者CD4+CD45RA-記憶T細胞比例顯著升高，CD4+CD45RA+62L+純真T細胞比例及及計數(shù)均顯著減少；4）與正常對照組和HBV攜帶者相比，慢性乙肝患者外周血調(diào)節(jié)性T細胞（CD4+CD25+CD45RO+）比例升高，可能是對肝臟組織炎癥壞死作出的反應(yīng)，用以保護宿主。 有報道慢性乙肝患者 CD19+ 、CD5+ CD19+ 的細胞百分比明顯升高，說明慢性乙肝患者體內(nèi)有較多的 CD5+ B 細胞活化，而介導(dǎo)體液免疫的主要免疫細胞為B 淋巴細胞，CD19+ 分子是 B 淋巴細胞的重要標(biāo)志，人體感染乙肝病毒后B細胞受到機體免疫系統(tǒng)的影響轉(zhuǎn)化漿細胞，從而產(chǎn)生與相應(yīng)抗體結(jié)合的抗體。 綜上所述，臨床上，外周淋巴亞群檢測對于分析慢乙肝發(fā)病機制，觀察療效及監(jiān)測預(yù)后，以及疫苗和藥物研發(fā)都有重要的臨床意義。 參考文獻 1. HBV感染患者外周血T淋巴細胞亞群水平及其與HBV-DNA載量的相關(guān)性研究 中外醫(yī)學(xué)研究 2020,18(27),10-12 2. 慢性乙型肝炎病毒感染者外周血淋巴細胞亞群的變化及檢測意義 中國慢性病預(yù)防與控制 2015 年 10 月第 23 卷第 10 期 Chin J Prev Contr Chron Dis，October 2015，Vol． 23，No． 10

通?；颊吲笥褜ρＲ?guī)非常熟悉，其中有淋巴細胞占白細胞的百分比和計數(shù)。其實呢，淋巴細胞還分為各種亞群，臨床上，經(jīng)常有醫(yī)生會開 “淋巴細胞亞群”項目，以幫助了解患者的免疫功能。 一、那么“淋巴細胞亞群”是群什么細胞？眾所周知淋巴細胞是構(gòu)成機體免疫器官的基本單位，是參與機體細胞免疫和體液免疫應(yīng)答功能的重要細胞。人的淋巴細胞根據(jù)其生物功能和細胞表面抗原的表達又可分為三大類：T淋巴細胞，B淋巴細胞和NK淋巴細胞，即是通常所謂的“淋巴細胞亞群”。這些細胞是如何分化而來的呢？從頭說起吧，骨髓造血干細胞分化為髓樣干細胞和淋巴樣干細胞。前者分化為紅細胞，血小板，和原粒細胞，其中原粒細胞繼續(xù)分化為粒細胞，包括嗜酸性、嗜堿性粒細胞和中性粒細胞。而淋巴樣干細胞分化為原淋細胞，繼續(xù)分化為T淋巴細胞、B淋巴細胞和NK淋巴細胞。這些T、B、Nk細胞也就是所稱的“淋巴細胞亞群”。當(dāng)然，T細胞還進一步分為輔助性和殺傷抑制性T細胞，調(diào)節(jié)性T細胞等。 二、在化驗單上，這些“淋巴細胞亞群”又是怎樣標(biāo)識的呢？CD3+ 代表總的T淋巴細胞，是機體免疫系統(tǒng)內(nèi)功能最重要的一大細胞群；CD3+CD4+代表輔助/誘導(dǎo)性T淋巴細胞即Th細胞；CD3+CD8+代表抑制/細胞毒性T細胞即Ts細胞。CD3-CD19+代表B淋巴細胞，CD3-CD56+CD16+代表自然殺傷性（NK）淋巴細胞。具體報告的是各類淋巴細胞的百分比（%），以及Th/Ts的比值。有的醫(yī)院除了百分比，還報告各種淋巴亞群的細胞絕對計數(shù)（就是每微升全血中含有的這種淋巴細胞的個數(shù)）。 三、淋巴細胞亞群是怎樣測定的呢？首先，檢測的標(biāo)本要求抽取2毫升肝素或EDTA-K抗凝全血。利用各種單克隆抗體，與標(biāo)本中淋巴細胞表面抗原結(jié)合，再配多色熒光染料，就可以通過流式細胞術(shù)的分析，區(qū)分各淋巴細胞不同的亞型，進而得到各亞群的比例及絕對計數(shù)。 四、為什么要測定淋巴細胞亞群呢？概括說，淋巴細胞亞群是了解機體細胞免疫和體液免疫功能的重要指標(biāo)，分析這些免疫細胞的比例和數(shù)量及活性對于評估機體的免疫功能非常重要。機體正常情況下，各種淋巴細胞亞群（T,B,NK）保持一定的數(shù)量和比例，相互作用，穩(wěn)定調(diào)節(jié)，維持著機體正常的免疫功能。當(dāng)不同的淋巴細胞亞群的數(shù)量及功能發(fā)生異常改變時，機體就會產(chǎn)生一系列的病理變化及免疫功能失調(diào)，導(dǎo)致疾病的發(fā)生。某種細胞亞群所占百分比或絕對計數(shù)過高或過低，都提示存在免疫功能的紊亂。 五、具體淋巴細胞亞群各項指標(biāo)的臨床意義是什么？T淋巴細胞參與機體的免疫應(yīng)答，B淋巴細胞參與機體體液免疫應(yīng)答，總T和總B可以用來判斷某些免疫狀態(tài)過激或低下。 1．總T細胞（CD3+細胞） （1）增高：提示體內(nèi)的T細胞免疫功能增強，見于臨床某些自身免疫性疾病活動期如SLE、重癥肌無力、慢性活動性肝炎、甲狀腺功能亢進、器官移植排斥反應(yīng)、T細胞白血病等。 （2）降低：提示體內(nèi)的T細胞免疫功能減低，見于惡性腫瘤、應(yīng)用免疫抑制劑、放化療過程中、先天性細胞免疫缺陷（胸腺不發(fā)育）、艾滋病、以及過勞等造成機體免疫功能處于相對較低的其他一些情況。 2. 總B細胞（CD3-CD19+） （1）增高：見于自身免疫性疾病，如過敏性紫癜等；慢性B細胞性白血病等 （2）降低：傳染性單核細胞增多癥等; 見于原發(fā)性B細胞缺陷?。ㄈ缧月?lián)無丙種球蛋白血癥）和重癥聯(lián)合免疫缺陷（T細胞同時缺如） 3、輔助/誘導(dǎo)性T細胞（CD3+CD4+細胞） （1）增高：提示體內(nèi)存在細菌等病原微生物感染 （2）降低：常見于惡性腫瘤，遺傳性免疫缺陷癥，各種病毒性感染性疾病，以HIV感染時減少最為明顯。也見于γ免疫球蛋白缺乏癥、胸腺發(fā)育不良、嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷病、嚴(yán)重創(chuàng)傷、大手術(shù)、應(yīng)用免疫抑制劑等。 4、抑制/細胞毒性T細胞（CD3+CD8+細胞） （1）增高：見于自身免疫性疾病。提示體內(nèi)存在病毒或胞內(nèi)寄生菌感染，主要見于HBV、CMV、EB等病毒及結(jié)核桿菌感染等。 （2）降低：見于γ免疫球蛋白缺乏癥、胸腺發(fā)育不良、嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷病、糖尿病等。 5、CD3+CD4+/CD3+CD8+細胞比值（Th/Ts比值） （1）增高：可見于某些自身免疫性疾病，如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、SLE、自身免疫性溶血性貧血、慢性活動性肝炎、I型糖尿病等；腫瘤及病毒感染等。此外監(jiān)測器官移植排斥反應(yīng)，若移植后比值較移植前明顯增加，則可能發(fā)生排斥反應(yīng)。 （2）降低：見于SLE腎病，傳染性單核細胞增多癥，急性巨細胞病毒感染，骨髓移植恢復(fù)期等。AIDS、再障、某些白血病、免疫缺陷綜合征、某些病毒感染、惡性腫瘤、結(jié)核病等。臨床抗感染有效時可見比值的逐步恢復(fù)。 （3）CD3+CD4+/CD3+CD8+細胞比值在器官移植受者免疫功能監(jiān)測、個體化免疫治療療效判斷中具有重要意義，比值小于0.2時必須立即停用免疫抑制藥。在造血干細胞移植患者中，CD4+細胞恢復(fù)晚于CD8+細胞，導(dǎo)致Th/Ts的比值顯著下降。HIV及某些病毒感染（EB病毒、SARS病毒等）患者Th/Ts的比值也顯著下降。艾滋病患者比值顯著降低，多在0.5以下。 6、NK細胞（CD3-CD16+和/或56+） 能夠介導(dǎo)對某些腫瘤細胞和病毒感染細胞的細胞毒作用。 （1）增高：常見于某些病毒性感染早期，長期使用干擾素及其干擾的誘導(dǎo)物，骨髓移植后，反復(fù)自然流產(chǎn)等。 （2）降低：見于惡性腫瘤特別是中晚期伴轉(zhuǎn)移的腫瘤；免疫缺陷或免疫功能低下，及使用免疫抑制劑等。 7、自然殺傷性T細胞（NKT細胞）：具有NK和T細胞的標(biāo)志，參與對細菌和寄生蟲的反應(yīng)，在控制病毒性感染中也發(fā)揮作用。 8、雙陽性細胞（CD3+CD4+CD8+細胞）：增高，提示T細胞分化發(fā)育紊亂，見于淋巴細胞白血病、骨髓異常增生綜合征等。也見于嚴(yán)重急性感染患者，尚未完成陽性篩選的T細胞提前釋放進入外周血的情況。 參考資料：BD公司宣傳手冊等

王阿姨體檢后看到體檢報告單上“腫瘤標(biāo)志物”其中的一個項“鐵蛋白”后面有個向上升高的箭頭，既然是腫瘤標(biāo)志物里的指標(biāo)升高了，這是不是說明得了癌癥??？那就讓我們先來認識一下鐵蛋白吧。 什么是鐵蛋白（SF）？ 鐵蛋白(Ferritin)是機體內(nèi)一種貯存鐵的可溶組織蛋白，是人體含鐵最豐富的一種蛋白復(fù)合物，分子量約450 000，其中含鐵17%～23%。鐵蛋白存在于體內(nèi)各組織和細胞中，特別在肝、脾、骨髓中含量高，腦組織中也有，外周血細胞中包括紅細胞、白細胞和血小板也都含有鐵蛋白。正常人血清中含有少量鐵蛋白。 鐵蛋白在人體里有兩重作用 一:作為鐵的“貯存庫”用于血紅蛋白合成； 二:將鐵保存在中空的球形蛋白內(nèi)，可以防止細胞內(nèi)游離鐵過多而產(chǎn)生有害作用。 血清鐵蛋白數(shù)值多少是正常的？ 男性：30-400μg/L； 女性：13-150μg/L； 新生兒：25-200μg/L。 注：血清鐵蛋白檢查各家醫(yī)院實驗室的參考值會有差異。 鐵蛋白數(shù)值變化有什么臨床意義？ 鐵蛋白升高： 1)體內(nèi)貯存鐵增加:原發(fā)性血色病、繼發(fā)性鐵負荷過大。 2)鐵蛋白合成增加:炎癥、腫瘤、白血病、甲狀腺功能亢進癥等。 3)貧血:溶血性貧血、再生障礙性貧血、惡性貧血。 4)組織釋放增加:肝壞死、慢性肝病等。 鐵蛋白減少： 常見于缺鐵性貧血、大量失血.、長期腹瀉、營養(yǎng)不良等。 低于13μg/L時即可診斷鐵缺乏。 大于100μg/L，即可排除缺鐵。 鐵蛋白為什么會升高？ 鐵蛋白升高，一是來源增加，二是存在清除障礙。 1.肝臟疾病，如慢性肝病、肝硬化、脂肪肝等，都是造成鐵蛋白升高的原因?；几尾r肝細胞受損，功能下降，導(dǎo)致鐵蛋白的攝取及清除受到影響，使鐵蛋白升高。 2.鐵負荷過多，如原發(fā)性血色病、反復(fù)輸血、不恰當(dāng)鐵劑治療等，也是鐵蛋白升高的原因。 3.血液系統(tǒng)疾病，如鐵粒幼細胞貧血、再生障礙性貧血、巨幼細胞貧血、溶血性貧血等，這些都是引起鐵蛋白升高的原因。 4.鐵蛋白水平和霍奇金病的病程密切相關(guān)；急性白血病鐵蛋白可升高，急性單核細胞白血病最明顯，急性粒細胞白血病次之，慢性白血病增高不明顯。 5.惡性腫瘤因腫瘤浸潤、壞死使鐵蛋白釋放增加，同時肝清除鐵蛋白能力降低，以及腫瘤細胞合成鐵蛋白增多，均可導(dǎo)致鐵蛋白升高。特別是急性非淋巴細胞白血病、淋巴瘤、肝癌、胰腺癌和肺癌均可使鐵蛋白升高，而食管癌、胃癌、結(jié)腸癌以及泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤不會影響鐵蛋白。 肝癌患者有鐵蛋白增高的原因可能是： 1)肝癌細胞能合成和分泌鐵蛋白或異鐵蛋白； 2)肝癌組織對鐵蛋白的攝取及清除受到影響； 3)肝細胞損害壞死，貯存在肝細胞漿中的鐵蛋白進入血中。 血清鐵蛋白雖非特異性，但除肝癌、胰腺癌中度升高外，其它消化道腫瘤如胃癌、直結(jié)腸癌均不升高。肝癌患者治療有效者血清鐵蛋白下降，而惡化和再發(fā)者升高，持續(xù)增高則預(yù)后不良。故血清鐵蛋白測定可作為療效監(jiān)測手段之一，特別是對甲胎蛋白陰性的患者更有意義。 6、炎癥或感染，急性感染和炎癥性疾病可促進去鐵鐵蛋白（天然的鐵儲存蛋白）合成，使鐵蛋白增高。甲狀腺功能亢進等，也會引起鐵蛋白升高。 所以，鐵蛋白升高就代表患了癌癥嗎？答案是：不一定！由于影響鐵蛋白的因素比較多，它并沒有特異性，所以鐵蛋白檢測數(shù)值并不能作為惡性腫瘤的診斷指標(biāo)，也不能完全預(yù)測惡性腫瘤的復(fù)發(fā)。 PS:想要準(zhǔn)確檢測到體內(nèi)血清鐵蛋白水平，一定要注意： 1)被檢測者應(yīng)空腹12小時以上再抽血化驗。忽視這一點，可能會導(dǎo)致檢查結(jié)果不同。 2)檢查前慎用鐵劑治療或禁食含鐵高的食物，如動物肝臟等;禁食能和鐵絡(luò)合的物質(zhì)，如茶等。 3)當(dāng)婦女在月經(jīng)期、妊娠期和嬰兒生長期、因體內(nèi)鐵的需要量增加，可使血清鐵降低，屬生理現(xiàn)象。 以上內(nèi)容轉(zhuǎn)摘。